Morphological and chemical changes of dentin after applying different sterilization methods / Avaliação das alterações morfológicas e químicas da dentina após a aplicação de diferentes métodos de esterilização

Aim: The present study evaluated the morphological and chemical changes of dentin produced by different sterilization methods, using scanning electron microscopy (SEM) and energy-dispersive X-ray spectrometry (EDS) analysis. Material and method: Five human teeth were sectioned into 4 samples, each divided into 3 specimens. The specimens were separated into sterilization groups, as follows: wet heat under pressure; cobalt 60 gamma radiation; and control (without sterilization). After sterilization, the 60 specimens were analyzed by SEM under 3 magnifications: 1500X, 5000X, and 10000X. The images were analyzed by 3 calibrated examiners, who assigned scores according to the changes observed in the dentinal tubules: 0 = no morphological change; 1, 2 and 3 = slight, medium and complete obliteration of the dentinal tubules. The chemical composition of dentin was assessed by EDS, with 15 kV incidence and 1  µm penetration. Result: The data obtained were submitted to the statistical tests of Kruskall-Wallis and ANOVA. It was observed that both sterilization methods – with autoclave and with cobalt 60 gamma radiation - produced no significant changes to the morphology of the dentinal tubules or to the chemical composition of dentin. Conclusion: Both methods may thus be used to sterilize teeth for research conducted in vitro. .

Objetivo: O presente estudo teve como objetivo avaliar as alterações morfológicas e químicas na dentina geradas por diferentes métodos de esterilização, através de microscopia eletrônica de varredura (MEV) e da análise por espectrometria de energia dispersiva de raios-X. Material e método: Seccionaram-se 5 dentes humanos em 4 amostras, as quais foram divididas em 3 espécimes cada, totalizando 60 espécimes. Os espécimes foram separados conforme os grupos de esterilização: calor úmido sob pressão; radiação gama cobalto 60; controle (sem esterilização). Após a esterilização, os 60 espécimes foram analisados por MEV, usando 3 aumentos: 1500X, 5000X, 10000X. As imagens foram analisadas por 3 examinadores previamente calibrados, que distribuíram escores referentes às alterações observadas nos túbulos dentinários: 0 = sem alteração morfológica, 1 = baixa obliteração dos túbulos dentinários, 2 = moderada obliteração, 3 = completa obliteração. A composição química da dentina foi avaliada por meio do processo EDS, com 15 kV de incidência e penetração de 1 µm. Os dados obtidos foram submetidos ao teste estatístico de Kruskall-Wallis com nível de significância de 5%. Resultado: De acordo com os resultados obtidos, verificou-se que a esterilização tanto por autoclave quanto por radiação gama cobalto 60 não provocou alterações significativas na morfologia dos túbulos dentinários e na constituição química da dentina. Conclusão: Concluiu-se que ambos os métodos podem ser utilizados para a esterilização de dentes em pesquisa in vitro. .

Avaliação da neutralização dos efeitos citotóxicos do ácido lipoteicóico em canais radiculares / Neutralizing evaluation of lipoteichoic acid cytotoxic effect

O ácido lipoteicóico (LTA) é um importante fator de virulência das bactérias Gram-positivas. Assim, o objetivo desse estudo foi determinar a eficácia do preparo biomecânico realizado com diferentes agentes irrigantes e medicações intracanal na neutralização do LTA em canais radiculares. Foram seccionados e padronizados 108 raízes de dentes humanos uni-radiculares. Após esterilização, os canais foram inoculados com solução de LTA. Após esta contaminação, os mesmos foram submetidos a preparo biomecânico através de sistema rotatório (BioRace)e divididos em 9 grupos, variando-se as soluções irrigantes (hipoclorito desódio 1%, clorexidina gel 2% e extrato glicólico de própolis 12%) e as medicações intracanal (hidróxido de cálcio + soro; hidróxido de cálcio +clorexidina gel 2%; clorexidina gel 2%). Foram realizadas 3 coletas dos canais radiculares: após o preparo biomecânico, após EDTA e após medicação intracanal por 14 dias. Realizou-se ativação de macrófagos com as amostras, os quais tiveram seu sobrenadante coletado após 24 horas. Este sobrenadante foi utilizado para verificação da produção de citocinas (TNF-α, IL-6, IP-10, MIP-1α e IL-1β) e G-CSF através de teste imunoenzimático (ELISA). De acordo com os resultados de S1 e S2,houve diferença estatística entre os vários grupos, sendo que o hipoclorito de sódio gerou as menores médias de TNF-α, IL-6, IP-10, MIP-1α e GCSFa própolis as menores médias de IL-1β. Em relação aos resultados de S3, todos os grupos apresentaram baixos índices de citocinas.Concluiu-se que o hipoclorito de sódio 1% associado a instrumentação rotatória é o agente irrigante mais eficiente na neutralização dos efeitos citotóxicos do LTA, seguido pelo extrato glicólico de própolis 12%. Além disso, todos os protocolos de tratamento analisados foram efetivos na neutralização dos efeitos citotóxicos do LTA

The lipoteichoic acid (LTA) is a Gram-positive bacteria’s virulence factor,which should be neutralized on endodontic treatment. The objective of thisstudy is determining the effectiveness of biomechanical preparation performed with different auxiliary solutions and different intracanal medications in the neutralization of LTA in root canals. For this, 108 human teeth were sectioned and standardizing. After sterilization, the canals were inoculated with known amount of LTA solution. After contamination of specimens, they were subjected to biomechanical preparation through rotary system (BioRace) and divided into 9 groups,according the irrigating solutions (1% sodium hypochlorite, 2%chlorhexidine gel and 12% propolis glycolic extract) and intracanal medications (calcium hydroxide + physiologic solution; calcium hydroxide+ 2% chlorhexidine gel; chlorhexidine gel 2 %). There were performed 3sample collections from the root canals: after biomechanical preparation,after EDTA (3 min) and after intracanal medication (14 days). Held macrophage activation with the samples, which had its supernatant collected after 24 hours. This supernatant was used to investigate the production (TNF-α, IL-6, IP-10, MIP-1α and IL-1β) and G-CSF by enzy melinked immunosorbent assay (ELISA). According to the results, there was statistic difference between the groups. Sodium hypochlorite showed thebest results on TNF-α, IL-6, IP-10, MIP-1α e G-CSF and propolis on IL-1β.In S3, all groups showed low indices. The sodium hypochlorite is the best irrigant in neutralizing cytotoxicity effects of LTA, and all protocols are efficient on neutralizing LTA cytotoxic effect

Avaliação da neutralização dos efeitos citotóxicos do ácido lipoteicóico em canais radiculares / Neutralizing evaluation of lipoteichoic acid cytotoxic effect

O ácido lipoteicóico (LTA) é um importante fator de virulência das bactérias Gram-positivas. Assim, o objetivo desse estudo foi determinar a eficácia do preparo biomecânico realizado com diferentes agentes irrigantes e medicações intracanal na neutralização do LTA em canais radiculares. Foram seccionados e padronizados 108 raízes de dentes humanos uni-radiculares. Após esterilização, os canais foram inoculados com solução de LTA. Após esta contaminação, os mesmos foram submetidos a preparo biomecânico através de sistema rotatório (BioRace)e divididos em 9 grupos, variando-se as soluções irrigantes (hipoclorito desódio 1%, clorexidina gel 2% e extrato glicólico de própolis 12%) e as medicações intracanal (hidróxido de cálcio + soro; hidróxido de cálcio +clorexidina gel 2%; clorexidina gel 2%). Foram realizadas 3 coletas dos canais radiculares: após o preparo biomecânico, após EDTA e após medicação intracanal por 14 dias. Realizou-se ativação de macrófagos com as amostras, os quais tiveram seu sobrenadante coletado após 24 horas. Este sobrenadante foi utilizado para verificação da produção de citocinas (TNF-α, IL-6, IP-10, MIP-1α e IL-1β) e G-CSF através de teste imunoenzimático (ELISA). De acordo com os resultados de S1 e S2,houve diferença estatística entre os vários grupos, sendo que o hipoclorito de sódio gerou as menores médias de TNF-α, IL-6, IP-10, MIP-1α e GCSFa própolis as menores médias de IL-1β. Em relação aos resultados de S3, todos os grupos apresentaram baixos índices de citocinas.Concluiu-se que o hipoclorito de sódio 1% associado a instrumentação rotatória é o agente irrigante mais eficiente na neutralização dos efeitos citotóxicos do LTA, seguido pelo extrato glicólico de própolis 12%. Além disso, todos os protocolos de tratamento analisados foram efetivos na neutralização dos efeitos citotóxicos do LTA.

The lipoteichoic acid (LTA) is a Gram-positive bacteria’s virulence factor,which should be neutralized on endodontic treatment. The objective of thisstudy is determining the effectiveness of biomechanical preparation performed with different auxiliary solutions and different intracanal medications in the neutralization of LTA in root canals. For this, 108 human teeth were sectioned and standardizing. After sterilization, the canals were inoculated with known amount of LTA solution. After contamination of specimens, they were subjected to biomechanical preparation through rotary system (BioRace) and divided into 9 groups,according the irrigating solutions (1% sodium hypochlorite, 2%chlorhexidine gel and 12% propolis glycolic extract) and intracanal medications (calcium hydroxide + physiologic solution; calcium hydroxide+ 2% chlorhexidine gel; chlorhexidine gel 2 %). There were performed 3sample collections from the root canals: after biomechanical preparation,after EDTA (3 min) and after intracanal medication (14 days). Held macrophage activation with the samples, which had its supernatant collected after 24 hours. This supernatant was used to investigate the production (TNF-α, IL-6, IP-10, MIP-1α and IL-1β) and G-CSF by enzy melinked immunosorbent assay (ELISA). According to the results, there was statistic difference between the groups. Sodium hypochlorite showed thebest results on TNF-α, IL-6, IP-10, MIP-1α e G-CSF and propolis on IL-1β.In S3, all groups showed low indices. The sodium hypochlorite is the best irrigant in neutralizing cytotoxicity effects of LTA, and all protocols are efficient on neutralizing LTA cytotoxic effect.

Influence of ultrasound and irrigant solutions on the bond strength of glass fiber posts to root canal dentine / Influência do ultrassom e de soluções irrigantes na resistência de união de pinos de fibra de vidro à dentina do canal radicular

Objective: Assessment of the influence of the ultrasound and irrigant solutions on the bond strength (BS) of glass fiber posts. Material and Methods: Sixty-six roots of bovine teeth standardized at 16 mm were used. The roots were submitted to a biomechanical preparation up to size #80 Kerr file, with irrigation of 5 ml of saline solution at every file change and then filled. The canals underwent partial desobturation and were divided into 6 groups according to the irrigant solution and the use of ultrasound prior to the post cementation: S – saline solution; C – 2% chlorhexidine solution; H –2.5% sodium hypochlorite solution; US – saline solution + ultrasound; UC – 2% chlorhexidine solution + ultrasound; UH – 2.5% sodium hypochlorite solution + ultrasound. After the cementation of the posts, the specimens were cut into 3 slices of 2 mm of thickness, perpendicular to its long axis. The samples were submitted to push-out test with crosshead speed of 1 mm/min and load of 50kgf. The data obtained were submitted to ANOVA and Tukey test (level of significance of 5%). Results: Groups C 7.77(±1.8)a, UC 7.82(±1.6)a, S 7.33(±2.2)a, US 6.16(±2.3)a, H 5.43(±1.3)b, UH 5.01(±2.3)b values in Mpa. Only the irrigant solutions showed statistically significant differences (<0.05). Tukey test revealed smaller bond strength for the specimens treated with Sodium Hypochlorite (b). Conclusions: The ultrasound treatment did not show significant difference compared with the other groups; therefore, its use can be indicated prior to the cementation of glass fiber posts without damage to the bond strength. The sodium hypochlorite solution showed the smallest BS values compared with the other groups

Objetivo: Avaliação da influência do ultrassom e de soluções irrigadoras sobre a resistência de união (RU) de pinos de fibra de vidro. Material e Métodos: Utilizou-se 66 raízes de dentes bovinos, padronizadas em 16 mm. As raízes foram submetidas a preparo biomecânico até Lima Kerr #80, com irrigação de 5ml de solução salina fisiológica a cada troca de lima, e foi realizada a obturação. Os espécimes foram parcialmente desobturados e divididos em 6 grupos de acordo com a solução irrigadora e a utilização de ultrassom antes da cimentação do pino: S – solução salina; C – solução de clorexidina 2%; H – solução de hipoclorito de sódio 2,5%; US – solução salina + ultrassom; UC – solução de clorexidina 2% + ultrassom; UH – solução de hipoclorito de sódio 2,5% + ultrassom. Após a cimentação dos pinos, os espécimes foram seccionados em 3 fatias de 2 mm de espessura, perpendiculares ao seu longo eixo. Os corpos de prova foram submetidos ao teste de push-out com velocidade 1 mm/min e carga de 50 kgf. Os dados obtidos foram submetidos aos testes de ANOVA e Tukey (nível de significância 5%). Resultados: Grupos C 7,77(±1,8)a, UC 7,82(±1,6)a, S 7,33(±2,2)a, US 6,16(±2,3)a, H 5,43(±1,3)b, UH 5,01(±2,3)b valores em Mpa. Apenas as soluções irrigadoras apresentaram diferença estatística relevante (<0,05). Ao teste de Tukey, percebeu-se uma resistência menor aos espécimes tratados com Hipoclorito de Sódio (b). Conclusões: O tratamento com ultrassom não demonstrou diferença significante em relação aos demais grupos, portanto pode ser indicado antes da cimentação de pinos de fibra de vidro sem prejuízo na resistência de união. A solução de hipoclorito de sódio apresentou os menores valores de RU comparados aos demais grupos.

Evaluation of apical leakage in root canals filled with different sealers / Avaliação do desempenho de diferentes cimentos obturadores no selamento apical de canais radiculares

Objective: To evaluate the apical leakage exhibited by root canals filled with gutta-percha points and three different endodontic sealers. Material and Methods: Thirty-five human molars were used and had their palatal (maxillary molars) and distal roots (mandibular molars) sectioned, standardized and instrumented with Mtwo rotary system. The roots were filled through active lateral condensation technique and divided into three groups (n=10), according to the endodontic sealer employed: G1- AH Plus, G2- Fill Canal, G3- MTA Fillapex. All groups were filled by gutta-percha points and endodontic sealer. Gutta-percha points were immersed into sodium hypochlorite for 24 h to achieve disinfection. After the filling procedure, the roots were immersed into Indian ink for posterior diaphanization and obtainment of the images through stereomicroscopy. By analyzing the images in Adobe Illustrator CS5 software, the level of apical leakage was determined. The data obtained were submitted to Kruskal Wallis and Dunn tests, with level of significance set at 5%. Results: Statistically significant differences were found between G1 and G3. G2 did not show statistically significant differences. G1 exhibited the smallest apical leakage mean (12.85), followed by G2 (109.84) and G3 (101.15). Conclusions: Root canal obturation with gutta-percha points and AH plus sealer through lateral condensation technique provided lower apical leakage rates than the other endodontic sealers evaluated

Objetivo: Avaliar a infiltração apical apresentada em canais radiculares obturados com guta-percha e três diferentes cimentos obturadores. Material e Métodos: Foram utilizados 35 molares humanos, os quais tiveram suas raízes linguais (molares superiores) e distais (molares inferiores) seccionadas, padronizadas e instrumentadas com o sistema rotatório Mtwo. As raízes foram obturadas através da técnica de condensação lateral ativa e divididas em 3 grupos (n=10), de acordo com o cimento obturador utilizado: G1- AH Plus, G2- Fill Canal, G3- MTA Fillapex. Todos os grupos foram obturados com o conjunto guta-percha e cimento obturador, sendo que a guta-percha utilizada permaneceu 24 h imersa em hipoclorito de sódio, para sua desinfecção. Após a obturação, as raízes foram imersas em corante tinta da Índia, para posterior diafanização e obtenção de imagens através de estereomicroscópio. Através da análise das imagens no programa Adobe Illustrator CS5 foi determinado o nível de infiltração apical. Os dados obtidos foram submetidos aos testes estatísticos de Kruskal Wallis e Dunn, com nível de significância 5%. Resultados: Verificou-se presença de diferença estatística significante entre o G1 e G3, sendo que G2 não diferiu estatisticamente dos demais grupos. O G1 apresentou a menor média de infiltração apical (12.85), seguida pelo G2 (109.84) e G3 (101.15). Conclusões: A obturação de canais radiculares com cones de guta-percha e cimento AH plus através da técnica de condensação lateral proporciona baixos índices de infiltração apical, quando comparada aos demais cimentos obturadores avaliados

Atividade antimicrobiana de um EDTA gel associado a peróxido de hidrogênio sobre cepas clínicas de Candida albicans / Antimicrobial activity of gel EDTA associated with hydrogen peroxide on clinical isolates of Candida albicans

O presente trabalho teve como objetivo analisar a atividade antimicrobiana de um produto composto por EDTA gel associado a peróxido de hidrogênio (Canal Plus®) sobre amostras clínicas de Candida albicans, utilizando o método de diluição em caldo. Foram incluídos no estudo isolados bucais e amostra padrão de Candida albicans (ATTC 18804). O Canal Plus foi diluído em caldo BHI em placas de microtitulação, obtendo-se as concentrações finais de 50% a 0,02%. O hipoclorito de sódio 2,5% foi utilizado como controle positivo. Após, foi adicionado suspensão padronizada de Candida albicans e as placas foram incubadas a 37ºC por 24 horas. Foram determinadas diluição inibitória mínima(DIM) e diluição fungicida mínima (DIF). O Canal Plus® foi capaz de inibir todas as cepas clínicas a partir da diluição 0,75%. Considerando os resultados obtidos, os dados sugerem que o Canal Plus tem eficiente atividade antimicrobiana sobre cepas clínicas de Candida albicans.

The purpose of this study was to analyze the antimicrobial activity of a composed product for EDTA gel associated with hydrogen peroxide (Plus® Canal) on clinical isolates of Candida albicans, using the method of dilution in broth. They had been enclosed in the study clinical isolates and reference strain of Candida albicans (ATTC 18804). The Plus Canal was diluted in broth BHI in microtitulation plates, obtaining the final concentrations of 50% to 0.02%. The sodium hypochlorite 2.5% was used as positive control. After, standardized suspension of Candida albicans was added and the plates had been stored in an oven at 37º C for 24 hours. Minimal inhibitory dilution and minimal fungicidal dilution had been determined. The Plus® Canal was capable to inhibit all clinical isolates from dilution 0.75%. Considering the results, the data suggest that the Canal Plus has efficient antimicrobial activity on clinical isolates of Candida albicans.